紫外可见分光光度计测定方法

紫外可见分光光度计测定方法 

1.对照品比较法

按各品种项下的方法,分别配制【zhì】供试品【pǐn】溶液和对照【zhào】品【pǐn】溶液,对照品溶液【yè】中所含【hán】被测成分的量应为供试品溶液中被测成【chéng】分规定【dìng】量的100%土10% ,所用溶剂也应*一致,在【zài】规定的【de】波长测定供试【shì】品溶液【yè】和对照品【pǐn】溶液的吸光【guāng】度【dù】后,按【àn】下式计【jì】算【suàn】供试品中被测溶液的【de】浓【nóng】度

C = (AX/AR)CR

式中CX为供试品溶液的浓度;AX为供试品溶液的吸收度;

AR为对照品溶液的浓度;CR为对照品溶液的吸收度。

2.吸收系数法

按各【gè】品种项下的方法配制【zhì】供试品溶液【yè】,在规【guī】定的波长【zhǎng】处【chù】测定其吸光度,再以该品种在规【guī】定条件下的吸【xī】收系数计算含量。用本法测定【dìng】时,吸收【shōu】系数通常应大于100,并注意仪器的校正【zhèng】和【hé】检定【dìng】。

3.比色法

供试【shì】品溶【róng】液加入适量显色剂【jì】后测【cè】定吸光度【dù】以测定其【qí】含量【liàng】的方法为比色法【fǎ】。用比色【sè】法测定【dìng】时，应取数份【fèn】梯度量的对照【zhào】品溶液,用溶剂补【bǔ】充至同一体积【jī】,显色后,以相应试剂为空白,在各【gè】品种规定的波长处测定各份溶【róng】液【yè】的吸光度,以吸【xī】光度为纵坐标【biāo】,浓度为横坐标绘制标准曲线,再【zài】根据供试品的吸光度在标准曲线上查【chá】得其相应的浓度,并【bìng】求出【chū】其含量【liàng】。也可取【qǔ】对照品溶液与供试品【pǐn】溶【róng】液同时【shí】操作【zuò】,显色后,以相应【yīng】的试剂为空【kōng】白,在各品种规定【dìng】的波长处测定对照品和供试品溶液的吸光【guāng】度【dù】。按上述【shù】方【fāng】法计【jì】算供试品溶液的浓度。